Siride Gnani

Durante il progetto di tesi ho acquisito esperienza nello sviluppo, ottimizzazione e applicazione di protocolli biochimici per la valutazione dello stato ossidativo e infiammatorio in campioni biologici.

La fase sperimentale (targeted), svolta durante il periodo di tesi, si è focalizzata sull’applicazione e ottimizzazione di saggi biochimici e immunoenzimatici. In particolare, ho eseguito saggi spettrofotometrici quali ABTS e FRAP per la determinazione della capacità antiossidante totale e MDA-TBA per la quantificazione della perossidazione lipidica, come indicatori di stress ossidativo.

Ho inoltre applicato tecniche immunoenzimatiche (ELISA) per la quantificazione di biomarcatori associati alla risposta infiammatoria, contribuendo alla caratterizzazione dello stato di stress infiammatorio dei campioni analizzati. La determinazione del contenuto proteico totale è stata effettuata mediante saggio di Bradford.

Parallelamente, durante il tirocinio di tesi magistrale svolto presso l’Università degli Studi del Molise, ho approfondito l’analisi di tipo untargeted da un punto di vista bioinformatico, lavorando su dataset omici generati da centri esterni. In questo contesto ho acquisito competenze nell’elaborazione, normalizzazione e interpretazione di dati complessi relativi a metaboliti, proteine e lipidi.

L’analisi dei dati è stata condotta utilizzando il linguaggio R, applicando metodi di statistica e analisi multivariata, tra cui Principal Component Analysis (PCA) e Partial Least Squares Discriminant Analysis (PLS-DA), oltre a strumenti di visualizzazione come volcano plot, al fine di identificare pattern discriminanti e potenziali biomarcatori associati a condizioni di stress ossidativo e infiammatorio.

La tesi ha riguardato lo studio della tirosina idrossilasi come enzima chiave nella biosintesi delle catecolamine, con particolare riferimento al suo ruolo nella fisiopatologia della malattia di Parkinson.

L’elaborato si è focalizzato sugli aspetti biochimici e molecolari della regolazione dell’enzima, analizzando i meccanismi alla base della degenerazione dei neuroni dopaminergici e il contributo di stress ossidativo e disfunzioni metaboliche nella progressione della patologia.

Sono state inoltre approfondite le principali strategie farmacologiche attualmente impiegate e in fase di sviluppo, con particolare attenzione agli approcci volti a modulare la sintesi e la disponibilità di dopamina e a contrastare i processi neurodegenerativi.

Durante il tirocinio ho acquisito esperienza nell’ambito della diagnostica di laboratorio, con attività di osservazione morfologica di cellule ematopoietiche mediante allestimento e colorazione di strisci di sangue periferico per l’identificazione di alterazioni compatibili con patologie ematologiche. Ho partecipato all’analisi di campioni biologici (sangue, urine e feci) e all’esecuzione di emocolture per la diagnosi di infezioni sistemiche. Ho inoltre osservato protocolli di screening prenatale per la valutazione del rischio di anomalie cromosomiche e acquisito familiarità con la gestione di analizzatori automatizzati in chimica clinica, comprendendo le principali fasi del processo analitico, incluse procedure di calibrazione e controllo qualità.